胃癌免疫组化怎么做

胃癌

胃癌免疫组化检测的操作流程包括标本采集与固定、标本处理与切片制备、抗原修复、一抗孵育、显色与复染等。

1. 标本采集与固定：标本来源为胃镜活检组织或手术切除标本，活检标本经胃镜钳取后立即放入10%中性福尔马林固定液，固定时间依标本大小调整活检6-12小时、手术标本不超24小时，固定液量为标本体积10倍以上，避免干涸或固定不足影响抗原保留。

2. 标本处理与切片制备：固定标本经梯度脱水、二甲苯透明、石蜡包埋制成蜡块，切片机切4-5μm厚切片贴载玻片，60℃烤片1-2小时牢固附着，再经脱蜡、梯度乙醇水化处理，为抗原修复做准备。

脱水

3. 抗原修复：甲醛固定致抗原表位交联封闭，需热修复柠檬酸盐缓冲液高压/EDTA微波或酶修复胰蛋白酶消化暴露表位，修复后冷却至室温，PBS冲洗去除残留液。

4. 一抗孵育：切片滴加特异性一抗如HER2、PD-L1等，4℃湿盒孵育过夜使充分结合，PBS冲洗3次每次5分钟去除未结合一抗。

5. 显色与复染：滴加对应二抗室温孵育30分钟，冲洗后加DAB显色液，显微镜下观察5-10分钟至棕黄色阳性信号出现，蒸馏水终止显色；苏木素复染细胞核，经脱水、透明、中性树胶封片制成永久切片供判读。

胃癌免疫组化结果需专业病理医师结合临床信息判读，患者应遵循医嘱规范送检标本如活检前空腹，检测后异常结果需及时沟通临床医生制定方案，日常注意饮食规律、避免辛辣刺激，定期复查相关指标监测病情。