生物实验中经常需要设置对照，以下对照设置正确的是

在研究光照强度对植物光合作用的影响时，需要设置不同光照强度的条件来进行实验。然而，在黑暗条件下无法进行光合作用，因此A选项错误。同样的，在研究温度对酶活性的影响时，需要设置0℃、100℃和正常温度三个不同条件来评估其作用。然而，C选项错误地描述了如何确定Ca2+是否为主动运输，因为细胞外Ca2+浓度大于或小于细胞内Ca2+浓度都会导致细胞失水并对细胞正常生命活动造成影响。另外，在研究细胞核功能时，将蝾螈受精卵横分割成有核和无核两部分是一个可行的方法，并且D选项是正确的。这个实验可以用来确认细胞核在生物体内扮演着重要角色。综上所述，本题答案选D选项。