如何从酵母中提取到较纯的rna

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qianbao

2023-03-08 04:08

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甲醛
甲醛

以下是从酵母中提取较纯RNA的步骤:

1. 均匀收集酵母细胞,并冷冻在液氮中以保护RNA不被降解。

2. 在低渗条件下(如0.1M EDTA)破碎细胞壁,并使用盐水或沉淀剂去除残留的细胞壁和细胞核。

3. 加入核糖核酸酶抑制剂(如RNasin),以保护RNA不被降解。

4. 通过加入缓冲液,如三乙胺盐酸盐(TE)缓冲液和甲醛或氯仿溶液,使RNA与蛋白质分离。

5. 用酚和氯仿提取RNA。对RNA-酚复合物进行离心可以将RNA从上层酚层分离出来。

6. 加入异丙醇或酮和氯仿以除去缓冲液和杂质。

7. 在绝对乙醇中洗涤RNA,并在真空条件下干燥。从而获得纯RNA样品。

通过这些步骤可以获得高质量的RNA,可以用于各种RNA检测和分析技术。

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